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一、原理
在【zài】中性【xìng】条件下用【yòng】过【guò】硫酸【suān】钾使式样【yàng】消【xiāo】解，将式样所含磷全部氧化为正磷酸盐，在【zài】酸性介质中，正【zhèng】磷酸盐与钼【mù】酸铵反映，在锑盐【yán】存【cún】在下，生成磷钼杂多酸【suān】，立即被抗坏血酸还原，生成蓝【lán】色络【luò】合物。
二、所需试剂
1、过硫酸钾，50g/L，5g过硫酸钾，纯水定容100ml。
2、抗坏血酸，100g/L，10g抗坏【huài】血酸，纯水定【dìng】容100ml。
3、硫【liú】酸，体积比【bǐ】1：1，150ml纯水：150ml浓硫酸，体积300ml（硫酸配制时注【zhù】意要将硫酸缓缓倒入水中，切【qiē】勿将水【shuǐ】倒入硫【liú】酸中，避免发【fā】生危【wēi】险，混合使用有【yǒu】水【shuǐ】冷【lěng】却）。
4、钼酸盐【yán】溶液【yè】，13g钼酸铵，纯水定【dìng】容100ml，0.35酒石酸锑【tī】钾纯水【shuǐ】定容100ml，
不断搅拌先将钼酸铵溶【róng】液【yè】缓缓倒入300ml（3试剂）硫酸溶液中【zhōng】，然后加入配置好的酒【jiǔ】石【shí】酸【suān】锑钾溶液【yè】缓【huǎn】和均匀。
5、浊度色度补偿液【yè】，纯【chún】水：浓【nóng】硫【liú】酸：抗坏血酸溶液【yè】（2试剂）=1:1:1，体积比。
（式样浑浊【zhuó】时，多做一个空白式【shì】样（所取水样，非空白用纯水）加入此补偿【cháng】液，加入【rù】过硫酸钾【jiǎ】与【yǔ】其他式样一同消【xiāo】解，不加抗坏血酸【suān】及钼【mù】酸盐溶液显【xiǎn】色）。
三、试样制备
1、取25ml所采【cǎi】水样，于50ml比色管中，共计两组，含一个平行样，取纯水25ml做空【kōng】白样，取7.5ml磷【lín】标【biāo】准使用【yòng】溶液（2ug/ml），定容【róng】至25ml，做标【biāo】曲中间校核式样，共计4组式样，若有【yǒu】多【duō】家【jiā】式样同【tóng】时分析【xī】，只增加【jiā】平【píng】行样及式样，即每家增加两组【zǔ】式样，不【bú】增加【jiā】空白式样和标【biāo】曲中间校核式样。
2、含浊度补偿液式样的【de】准备，针对【duì】浑浊的水【shuǐ】样，即多增【zēng】加【jiā】一个采集式样【yàng】，加【jiā】过硫酸钾消解，然后加【jiā】入色【sè】度【dù】补偿液，不加抗坏血酸和【hé】钼酸盐溶【róng】液进行显色。
四、式样消解
所有制备好【hǎo】的式样中（含空白式样及色度补偿式样），都加入4ml过硫【liú】酸钾溶【róng】液（50g/L）,用布和线将比色【sè】管的玻【bō】璃塞扎紧【jǐn】，至【zhì】于高【gāo】压蒸汽锅中加【jiā】热，蒸汽锅压力【lì】为【wéi】0.11mpa，温度【dù】120℃左右，消解30分【fèn】钟，然后取【qǔ】出，冷却至室温，制得消解液。
五、显色
在消【xiāo】解液中加【jiā】入1ml抗坏血酸（100g/L），混合均匀，30秒后加【jiā】入2ml钼酸铵【ǎn】溶液，混合均匀，静置【zhì】15分【fèn】钟。（添加过【guò】浊度补偿【cháng】液的式样【yàng】不添加抗坏【huài】血酸溶液和钼酸铵溶液，添【tiān】加3ml浊【zhuó】度补偿液）。
六、分光光度测试
光程30mm比色皿，700nm波长，以纯水做参比（既以【yǐ】纯水校准分【fèn】管【guǎn】光度计的透光率），分【fèn】别测定式样中【zhōng】的吸光【guāng】度【dù】，然后【hòu】扣【kòu】除空白式样的吸光度【dù】。添加浊度补偿的式样，同样测试吸光度，用同批【pī】次显色式样吸【xī】光度【dù】扣除浊度【dù】补偿吸光度，再【zài】扣【kòu】除空【kōng】白【bái】式样吸光度。
七、标准曲线制作
取总磷【lín】标准溶液（1mg/mL）1ml，纯水【shuǐ】定容【róng】至500ml，配制【zhì】成2ug/ml的标准【zhǔn】使【shǐ】用液，取7支50ml具【jù】塞【sāi】比色管，分别【bié】加入【rù】标准【zhǔn】使用液，0ml，0.5ml，1ml，3ml，5ml，10ml，15ml，纯水【shuǐ】定容至【zhì】25ml，重复第四、第五，第【dì】六部【bù】分，测得吸光度，然后【hòu】用excel表格，绘制【zhì】出标准曲【qǔ】线，相关【guān】系数在0.9990以上。
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